通过第一篇的套路总结，现在对于标题、摘要、介绍的套路，可以说是比较熟悉，看这部分的内容也很快速，因此这篇的重点也是放在Results上！
标题
标题：TNFR2促进调节性T细胞介导的两性神经病理性疼痛的恢复。
关键词：TNFR2调节性T细胞神经病理性疼痛两性
最关键的关键词：TNFR2
疾病关键词：神经病理性疼痛
逻辑关系：1.TNFR2对调节性T细胞发生的介导作用有促进的作用。
看了文章后总结出来的：TNFR2激动剂作用在Tregs上后，如何通过Tregs作用于其他T细胞来发挥作用的?
2.调节性T细胞能够介导神经病理性疼痛的恢复（这个看这个标题的意思像是已经研究出来过了的）
3.总的大逻辑：TNFR2促进来自不同性别的神经病理性疼痛的恢复。
摘要
1.介绍最关键的关键词：
TNFR2是跨膜受体，并且和免疫调节和组织再生有关（大方面，并没有细化到神经方面）
2.提到了总的大逻辑
3.再次提到了TNFR2的作用：主要是详细到了神经方面的作用
4.5.TNFR2agonistEHD2-sc-mTNFR2的治疗促进恢复
具体表现在：1.减少神经损伤2.缓解外周和中枢炎症3.促进中枢神经系统(CNS)浸润的髓样细胞向抗炎/修复表型的复极化。
前几句一直在说最显而易见的逻辑关系：
TNFR2能够促进神经病理性疼痛的恢复。
4.终于重点提到了其他的关键词：T细胞
提到了另一个逻辑：T细胞促进神经病理性疼痛的恢复，并提到了它作为中间性桥梁的重要逻辑作用。
5.再次强调了一下TNFR2的逻辑重要性以及Treg的逻辑重要性。看起来就好像是对前面讲的话的一个总结。
6.在此总结一下：TNFR2（最最关键词）这是个新的治疗方向。
介绍
Why?
第一步：1.2.都在讲.neuropatheticpain的影响。第3句提到了unmet（没被满足的，经常提）
以上都是准备工作
第二步、第三步、第四步融在一起，重点在讲第三步：4.提到了最近的有一个已经被研究出来的：免疫系统在调节神经病理性疼痛方面起重要作用
How?——基本上就是根据标题的关键词进行搜索
1.TNF是免疫系统中调节炎症的主要因子。2.已有参考文献证明，在周围神经损伤的动物和和人的模型中，TNF升高；并且应用TNF会引起疼痛。（）有这个参考文献才能从免疫系统在调节神经病理性疼痛方面起作用这个研究中立马想到：TNF这个免疫系统的一员。
3.下面就是详细在讲TNFR了。
TNFR1：促进炎症和组织降解、介导mechanicalallodynia和thermalhyperalgesia、在神经病理性疼痛的发展和维持中起重要作用、在男性神经病理性疼痛中起作用（因此，药物阻断TNFR1信号只对雄性动物有效，而对雌性动物无效（这个药物只是在疼痛治疗这一个方面有性别差异，其他方面并没有））
TNFR2：免疫调节、组织稳定、组织再生。在炎症早期和神经病理性疼痛早期起作用。其免疫调节作用主要是由Tregs细胞（的扩增和稳定）介导的。
4.Tregs是一种高度专业化的T细胞亚群，主要作用是抑制免疫反应。
自然而然的提到：Tregs细胞在疼痛起始中的作用。
What?这一句还是在强调大逻辑。
1.已经研究出来，男性女性的神经病理性疼痛的发展机制不一样，因此，需要不同的治疗策略。
2.因此，研究的是，不同性别的神经病理性疼痛TNFR2的作用
3.TNFR2的作用很大，且独立于性，也就是说不管男性还是女性，TNFR2都能治疗。
如何读Results?
先把看标题时研究出来的逻辑关系放在这里
逻辑关系：
1.调节性T细胞能够介导神经病理性疼痛的恢复
第一句结论：Tregs能介导mechanicalallodynia（神经病理性疼痛的一种）的恢复
（这个看这个标题的意思像是已经研究出来过了的）
2.TNFR2对调节性T细胞发生的介导作用有促进的作用。
怎么个促进法？这是本文要研究的问题吗？
其实本文并没有说明具体是为什么，反而就是做实验发现TNFR2能促进神经病理性疼痛，所以就有促进作用。不说理论的机制，如何如何，反而就是做实验告诉你，就是这样的。
还要研究出来TNFR2有促进作用，那么就是新的治疗手段：TNFR2外源性激动剂。所以说，一般研究中，笔墨花费更多的，不是内源性TNF，而是TNFR2
看了文章后总结出来的：TNFR2激动剂作用在Tregs上后，如何通过Tregs作用于其他T细胞来发挥作用的?
3.总的大逻辑：TNFR2促进来自不同性别的神经病理性疼痛的恢复。
第二句结论：TNFR2对mechanicalallodynia的恢复很重要
第三句结论：TNFR2激动剂对神经病理性疼痛有治疗作用
第四个结论：TNFR2激动剂减少中枢和周围炎症。
第五句：TNFR2激动剂通过Tregs促进疼痛恢复。
第一条结论：mechanicalallodynia的恢复依赖于Tregs
建立研究之前所能查到的资料：
1.以往的研究：Tregs减少提高mechanicalallodynia的严重性；Tregs增多减少男性动物的mechanicalhypersensitivity。这句以往的研究讲的是Tregs对神经病理性疼痛的影响，而不是对其恢复的影响。这句是有参考文献的。
建立研究之前所要设定的条件：
因为性别的不同而要2.因为疼痛在男性女性中发病机制不同，因此，在研究Tregs时，特意区分了在雌性和雄性中的对比研究。
而且很有可能Tregs对男女性别神经病理性疼痛恢复的影响还不同。
接下来就开始建立研究了。
3.首先是建立康复模型:
男性、女性在外周损伤后8周后的CCI介导的mechanicalallodynia模型。
建立好模型后就是要进行试验了。这个结论研究的就是Tregs对模型的影响。Tregs本来就有啊，所以总不能做个实验室是：把Tregs加入到疾病模型中吧！所以要做的实验是：疾病模型中没有Tregs会发生什么？那么如何消减Tregs呢？用的是抗CD25+抗体+PC-61来消减Tregs。意思就是说Tregs就是CD25+
实验背后的逻辑：Tregs对疾病恢复的影响
实验：4.然后消减男女小鼠中康复过程中的Tregs
结果出来了：5.结果两者都延迟康复。且Tregs的消除对男性神经病理性疼痛的恢复的影响更大。
这句话说明了Tregs减少会导致康复延迟
这句话说明了TNFR2对性别没影响，但是Tregs对性别影响是有的。
对性别有影响了，然后呢也没细说啊！
不相关的实验做完就会有的表现：这个应该算是做了处理后的具体表现，表现为Tregs细胞减少，但是总的T细胞比例居然没有减少，这一点是否说明有其他T细胞升高了呢？：6.虽然脾脏CD3+T细胞（总T淋巴细胞）的总百分比没有改变，但我们观察到损伤后12周的FoxP3+Tregs（也就是指调节性T细胞）显著降低。
7.另一个结果：Tregs的水平与男性女性的恢复有关。（再次说明了Tregs的重要性）
不相关的为了证明实验的严谨性
8.在和对照组对照中。没有观察到其他细胞亚群的变化。这句话是为了证明实验的严谨性。
第二条结论：TNFR2对于MechanicalAllodynia的恢复很重要
建立研究之前所能查到的资料：1.由于TNFR_2在神经元恢复(7)和Treg功能(22)中的作用已被充分证实。这都是有参考文献的。
就做了一个实验来说明TNFR2在MA恢复中的重要作用。
做实验：当然怎么做实验呢？肯定也是先让TNFR2-/-，由此来比较
比较WT小鼠和TNFR2缺失小鼠在CCI中的疼痛恢复。
结果：2.上述实验的结果：TNFR2缺失的小鼠没有恢复。
说明;这就是最正常的结果呀！正好证明了这个逻辑：TNFR2对MA的恢复很重要。
3.还有结果就是：尽管脾脏总CD3+T细胞百分率无变化(图2B)，但损伤的TNFR_2?/?小鼠的+Treg细胞的百分率明显低于损伤的WT小鼠和未损伤的TNFR_2?/?小鼠。这个结果说明了：TNFR2在MA情况下，对Tregs有作用。
不相关，严谨性：
4.还特意说明了这个结果：WT和TNFR_2?/?小鼠在损伤后其他免疫细胞百分率无明显差异(P0.05)。这个结果纯粹就是为了证明实验的严谨。
5.还特意又说明了一个结果：此外，在未受损伤的wt和tnfr2?/?小鼠之间，所有被分析的免疫细胞亚群的百分比没有明显的变化。也是为了证明实验的严谨。
另另一个结果：6.NF是大的有髓纤维的标志，尽管NF在WT小鼠上升高，TNFR2-/-小鼠中，NF是慢性损失的。
7.GAP43蛋白是神经修复的标志，在CCI后,GAP43在WT小鼠中升高，但在TNFR2-/-小鼠中降低。
8.CD68是巨噬细胞表达的蛋白，在WT小鼠和TNFR2-/-小鼠中都升高
9.CGRP是感觉神经元释放的神经肽，在神经损伤和神经炎症后升高。CGRP也都升高
说明：10.89提示CD68和CGRP的表达水平不受内源性TNFR2信号的影响；NF和GAP43则受TNFR2的影响
不相关，严谨性：
11.这一句是为了验证实验的严谨性。
第三个结论：TNFR2激动剂可以治疗神经病理性疼痛
想要研究受体，第一步是它表达在哪里？
第二步是它被激动剂激活了后的下一步是？
建立研究之前所能查到的资料：1.第一步：TNFR2表达在Tregs上，
第二步：激活其他T细胞、髓系细胞和其他免疫细胞。（这是参考文献中本来就有的东西）
其实这个逻辑想讲的是：TNFR2激动剂是如何作用在Tregs上的TNFR2来发挥作用的？
2.又证实了，对第一句参考文献里的研究更加详细验证说明了：Tregs和髓系细胞表达的TNRF2表达得更多。
3.CCI后，除外周中性粒细胞和脊髓巨噬细胞外，几乎所有分析的免疫细胞亚群的TNFR2表达均增加。这一句是说明了CCI对TNFR2表达的影响。
实验：4.TNFR2的外源性激活能否对CCI模型有治疗性？
直接用TNFR2外源性激动剂直接作用于CCI模型
5.为了选择性激活TNFR2，采用激活剂
结果：6.7用实验证明了真的有效
说明了：TNFR2外源性激活剂对CCI模型有治疗性。
另一个结果：8.除了治疗mechanicalallodynia，还能治疗thermalhyperalgesia和coldallodynia。
说明了TNFR2在神经病理性疼痛的恢复中的较全面普遍的作用。
从这一个知道了，前面就是一直都在提：TNFR2在mechanicalallodynia中有作用，这才提到了在整个神经病理性疼痛的恢复中都有作用。
实验：9.为了说明激活TNFR2才能发挥神经病理性疼痛恢复的作用。
比较WT和TNFR2-/-对TNFR2激动剂的反应。
结果：TNFR2-/-对激动剂没反应：
说明了：激活TNFR2才能发挥神经病理性疼痛恢复的作用
另一个结果：10.TNFR2激动剂治疗导致小胶质细胞/巨噬细胞活性降低，脊髓中CD68表达上调减少(图3D)和损伤介导的CGRP增加减少。
说明了CD68、CGRP虽然不受到内源性TNF影响，但受到外源性TNFR2受体激动剂的影响，影响结果是减少。这两个因子减少的原因都是因为小胶质细胞（小胶质细胞存在于中枢神经系统中，而CGRP也存在于中枢神经系统中。所以是不是可以看成因为小胶质活性降低，所以CGRP降低）/巨噬细胞（CD68就是巨噬细胞表达的）的活性减少
结果：11.TNFR2的外源性激活会导致NF和GAP43的增高。
说明：TNFR2激动剂促进神经再生和神经修复。
结果：12.TNFR2的外源性激动剂会使preBDNF降低，它是促进了神经元细胞的死亡和生长锥的收缩
13.然而，mBDNF升高，它是促进神经存活和再生。
说明：TNFR2激动剂促进神经存活和再生。
第四个结论：TNFR2激动剂减少中枢和周围炎症。
结果：1.TNFR2激动剂除了下调脊髓中CGRP的表达，还可以减少坐骨神经中CGRP+神经元的数量，这表明周围神经系统中神经元损伤和疼痛信号的减少。
说明：TNFR2激动剂可以减少周围神经系统中神经元损伤
建立研究之前所查到的资料：2.外周神经损伤的第一个信号：免疫细胞聚集到外周神经上，所以外周神经损伤时免疫细胞升高。
结果：3.TNFR2激动剂使得坐骨神经中炎症标志物下降，但是BDNF却升高。外周总的T细胞降低，而Tregs细胞却升高。TNFR2使得外周神经损伤
说明：TNFR2激动剂减少外周炎症；促进神经存活；TNFR2激动剂升高外周Tregs细胞，降低外周其他T细胞
结果：4.同时中枢神经系统，Tregs也升高，但是CD4+、CD8A+表达却降低
TNF和NOS2的表达降低，IL10、MRC1和ARG1的表达增加
说明：TNFR2激动剂升高中枢Tregs细胞，降低中枢其他T细胞；降低内源性TNF、降低NOS2；促进IL-10（多是CD4+T细胞生成的）、MRC1、ARG1的表达
技术：用一种新的技术研究脊髓中免疫细胞的浸润——这其实是研究TNFR2激动剂对中枢神经系统的影响。所以说这只能说叫用新技术来研究，得到结果。不能叫做实验。
所以说，得到结果有两种方式：新技术、做实验。
1.一个结果：
实际上，TNFR2激动剂使用后，脊髓中的T细胞减少——这是重点
2.另一个结果：
TNFR2激动剂使用后，脊髓中的Tregs是升高的，但这好像不重要。——这不是重点
3.另另一个结果：
TNFR2激动剂使用后，减少了浸润性骨髓源性细胞（脊髓源性细胞其中就包括小胶质细胞）对脊髓的浸润，但不影响小胶质细胞的数量。这几句难道是说：总体上来说是减少了中枢神经系统细胞数量，但是减少的不是小胶质细胞的。
详细说说解释上面这句：TNFR2激动剂处理并不影响小胶质细胞的极化，但是会导致骨髓源性细胞中，诱导型一氧化氮合酶(iNos)表达降低，精氨酸酶1(Arg1)表达增加
说明了：TNFR2激动剂会减少中枢神经系统细胞数量，不减少小胶质细胞数量，但影响其活性。
在建立研究前查到的资料：在受伤两周后，脾脏的T细胞亚群明显升高。另一个结果：TNFR2激动剂处理的小鼠CD3+、CD4+和CD8+T细胞的百分比没有增加，表明选择性激活TNFR2可消除损伤介导的免疫细胞扩张。
说明：通过查到的资料和做实验得到的结果知道：正常情况下，在受伤2周后，T细胞亚群就会升高，最开始受伤时，是中性粒升高，两周后就是T细胞升高，慢慢的转向慢性，这叫免疫扩张。而5周后，使用TNFR2激动剂后CD3+、CD4+和CD8+T细胞的百分比没有增加，这叫免疫扩张被消除，抑制了转向慢性。。
对比于假受伤组（这是什么*）盐水处理组脾脏Tregs显著降低。
在使用激动剂后，Tregs的变化并没有什么区别。这与之前的观察结果一致，TNFR2激动剂增加Treg增殖。CD3+、CD4+和CD8+T细胞的百分比没有增加
两组之间没有观察到5WPI的差异(图6C)。此外，EHD_2-sc-mTNFR_2可阻止损伤引起的脾脏CD11b+CD、?、Ly6G+中性粒细胞和CD68+单核/巨噬细胞百分率的降低，提高CD11c+MHCII+树突状细胞2WPI的百分率。与T淋巴细胞相比，中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞的百分比在5WPI中没有变化。CD45R+B细胞百分率在2wpi和5wpi无明显变化(SI附录，Fig.。S10)。由于中枢神经系统(CNS)驻留细胞(如小胶质细胞)上的Tregs和TNFR2都被证明可以减少神经炎症和促进神经保护(15，30，31)，我们调查了EHD2-sc-mTNFR2是否被转运到脊髓。事实上，我们能够在2周和5周后在脊髓中检测到EHD2-sc-mTNFR2(SI附录，FIG。S11)。
第五句：TNFR2激动剂通过Tregs促进疼痛恢复。
说明一下研究的目的：TNFR2是否是通过Tregs来促进疼痛恢复。
实验：一组去除Tregs，一组做对比实验，并没有去除，再给予TNFR2激动剂
结果：去除的没恢复
说明：TNFR2激动剂通过Tregs促进疼痛恢复。
结果：激动剂治疗降低Tregs未被去除组T细胞亚群的扩张；
说明：激动剂能够通过Tregs细胞来抑制T细胞亚群的增生
处理了就会出现的现象：Tregs水平显著降低
结果：PC-61诱导的树突状细胞的耗竭并不能消除EHD2-sc-?-mTNFR2治疗后脾脏CD11b+CDmTnFR2+中性粒细胞、CD68+单核/巨噬细胞和CD11c+MHCII+树突状细胞百分率的增加
说明：这些作用不参与EHD2-sc-mTNFR2对CCI模型的治疗作用。
说了一句不相关的证明实验严谨性的话。
又是一个结果：
目的：证明结论所说的。
Discussion
第一段一直在概述：先说TNFR1已经研究出来在男性疼痛发展中期重要作用，其靶点也只在男性治疗中起作用。对比提到了TNFR2在男性女性的治疗中都可以起到作用。又说到了Tregs在治疗中的重要作用
第二段：一开始提到了TNF的作用，再提到它与神经病理性疼痛的联系，由此引出TNFR2在疼痛发展的早期阶段很重要。
TNFR2在免疫机制方面起着重要作用。T淋巴细胞在慢性疼痛中起着疼痛作用。周围神经损伤，小胶质细胞被激活，促进炎症反应。抑制小胶质细胞的激活可以减轻脊神经结扎后的机械性痛觉异常和痛觉过敏(39例)，并推测小胶质细胞在长期维持痛觉异常中的作用。我们发现外源性TNFR2激活减少了外周T效应细胞的扩张
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